二抗结合一抗以允许检测、分选和纯化目标抗原。由于它们对一抗种类和同种型具有特异性，因此可以检测感兴趣的蛋白质。是否需要使用二抗取决于您的抗体检测方法。直接与间接检测方法检测目的抗原的方法可以是直接的或间接的(图1)：直接：通过直接与标记物偶联的一抗(即偶联一抗)来检测抗原，因此不需要二抗。间接：抗原由结合的二抗检测，该二抗针对一抗的宿主物种产生并与一抗结合。间接方法可提供更高的信号强度。因为多种办法标记的二抗可以间接结合每种抗原(图1)。间接检测还可以包括放大步骤以增加信号强度。直接或间接检测的选择通常取决于靶抗原的表达水平。直接检测合适分析高表达的抗原。相反，间接检测更适合研究表达不良的抗原，这受益于二抗提供的信号放大。图1.使用荧光团标记的抗体直接和间接检测抗原的示意图。在为您的实验选择最合适的方法之前，这两种方法都有一些有点和局限性需要考虑(表1)。表1.直接检测方法与间接检测方法的比较。直接检测间接检测时间通常较短，因为只需一个贴标步骤。使用共轭二抗需要额外的步骤和更长的时间。复杂性协议中的步骤较少，因此是一种更直接的方法。在多重实验中，您需要选择合适的二抗或抗体组合，这增加了实验的复杂性。敏感性与间接法相比，信号可能会显得较弱，因为没有二抗，而二抗通常可以放大信号。多种二抗可能与一抗结合，从而产生放大信号。背景非特异性结合降低。含有内源性免疫球蛋白的样本可能会出现较高的背景值。选择直接结合的一抗使用直接共轭的一抗(例如，与酶标记或荧光标记物共轭)可以加快和简化方案，省去二抗染色步骤。此外，共轭一抗还能使物种交叉反应最小化，消除二抗可能出现的非特异性结合。荧光共轭一抗是进行多色实验的理想工具，因为它们能让您灵活地组装所需的多重面板。选择一抗共轭物时要注意抗体的特异性。最好选择重组单克隆抗体，这种抗体特异性高，批次间一致性好。选择合适的第二抗体如果使用间接检测，则需要选择合适的二抗。二抗是通过用作为免疫原的抗体对动物进行免疫而产生的。产生的二抗将与动物免疫过的抗体类型结合。二抗的描述性名称揭示了与之结合的一抗的类型。这些名称包括前缀"抗"，表示它们的反应性。例如，如果动物用兔IgG进行免疫，产生的二抗将与兔IgG结合，称为抗兔IgG。在选择第二抗体时，您需要考虑它是否能选择性地与第一抗体结合并使您能检测抗原，这取决于以下几个关键因素。寄主物种用于培养二抗的宿主物种必须与一抗不同。例如，如果一抗是在兔体内培养的，那么二抗就需要在其他物种体内培养；驴抗兔二抗就很合适。图2.利用二抗的名称来了解它与哪一物种发生反应。二抗在驴体内培养(A)，与兔抗体结合(B)。结合同型性和特异性二抗必须与一抗的同种型结合。一抗通常为IgG同型。因此，二抗需要与IgG结合。通常，抗IgG二抗与重链和轻链(H&L)结合，但也可与一抗的其他区域结合。图3.利用二抗的名称了解其结合的一抗的种类、同种型和区域。该第二抗体与兔IgG的H&L区域特异性结合(B、C、D)。为不同应用选择共轭物将荧光染料、蛋白质、酶和生物素等标签与二抗结合，可观察到目标蛋白质的存在。荧光标签在一定波长的光激发下会发出可视范围内的光。荧光标签有几种，都有各自的激发和发射特性。酶标记物，如辣根过氧化物酶(HRP)和碱性磷酸酶(AP)，与适当的底物结合会形成彩色沉淀。生物素化抗体在与阿维菌素-生物素-酶或荧光染料复合物(通常简称为ABC试剂)(即与酶或荧光染料共轭的阿维菌素或链霉亲和素)结合后可用于信号放大。图4.二抗标签通常标在抗体名称的末尾。这种二抗与绿色荧光团AlexaFluor®488连接。共轭物的选择取决于应用。酶联二抗在ELISA或Western印迹应用中最受欢迎。相反，在流式细胞仪和ICC中，人们更倾向于使用与荧光蛋白或染料(如AlexaFluor®)连接的二抗。下面我们将针对您可能使用的主要应用(表2)列出一些建议的二抗。表2.为不同应用选择标记有酶或荧光色素的二抗。二抗酶荧光IHCHRP、HRP聚合物、生物素(与酶或荧光素结合的阿维丁/链霉亲和素)AlexaFluor®,Cy®dyes,FITC,PEICC/AlexaFluor®,Cy®dyes,FITC,PEWesternBlotHRP,APIRDye®,Alexa680,Alexa790ELISAorELISPOTHRP、生物素(与酶或荧光素结合的阿维丁/链霉亲和素)/FlowCytometryorFACS/AlexaFluor®,Cy®dyes, FITC,PEIHC=免疫组织化学，ICC=免疫细胞化学，FACS=荧光激活细胞分拣，HRP=辣根过氧化物酶，AP=碱性磷酸酶参考文献1. https://ptglab.com/news/blog/secondary-antibody-selection/ Secondaryantibodyselectionguide2."SecondaryAntibodiesasProbes". www.thermofisher.com.Retrieved 2017-05-31.3."F(ab')₂FragmentSecondaryAntibodies-JacksonImmunoResearch". www.jacksonimmuno.com.Retrieved 2021-01-29.4."FabFragmentSecondaryAntibodies-JacksonImmunoResearch". www.jacksonimmuno.com.Retrieved 2021-01-29.5."Secondaryantibodyreviewbasedonformalpublications". secondary-antibody.com.Archivedfrom theoriginal on2008-04-17.Retrieved 2008-04-16.

健康中国 2023-12-2108:00 发表于北京儿童呼吸道感染临床用药方面需要注意什么？对患病儿童，如何做好居家护理？广东省广州市妇幼保健院呼吸科主任卢根：儿童用药是不同于成人的，作为家长特别要注意以下几点：第一，在没有医生指导的情况下，不要自行给孩子服用抗菌药物。第二，在呼吸道感染后，尤其是发热、高热消退后，咳嗽症状会持续数天或数周，这是机体自我恢复和自我保护的一种功能，绝大部分是可以不需要干预自行恢复的，因此不推荐常规使用镇咳药物。第三，要注意药品的相互作用，不要同时服用退热药和含有解热镇痛的复方感冒药，同时也避免联合应用功能相同和成分重叠的中成药，这样会增加一些药物不良反应的风险。儿童患病后，应该根据病情选择居家休息或及时就医，不建议去入园或上课，这样避免交叉感染。居家护理要注意几点：第一，发热时要适当减少海鲜、鸡蛋等容易引起过敏的蛋白质的摄入，避免食用煎炸烤或辛辣刺激的食物，尽量多吃一些富含维生素的水果和蔬菜，如苹果、柑橘、白菜、西红柿等。第二，教会孩子良好的卫生习惯。尤其多子女家庭，要尽量做好患儿和健康儿童的隔离，这样避免家庭内交叉感染。第三，患儿出现了病情变化，如剧烈咳嗽或出现了呼吸急促、高热持续不退等情况，需要及时就医。最近儿童流感有所增多，可以服用药物来预防流感吗？有家长反映，有些儿童感染后病程长，这是为何？广东省广州市妇幼保健院呼吸科主任卢根：预防流感最有效和最经济的手段就是接种流感疫苗。国内外大量研究实践已证实，接种流感疫苗可以显著降低罹患流感和严重并发症的风险，因此建议儿童都接种流感疫苗预防流感。关于儿童感染后病程长的问题，要从具体情况来看。如果是流感病毒感染，多呈急性的病程，大多数的症状会在3~5天消失，绝大部分的病程在一周内恢复。如果是支原体感染，其实大部分还是自限性的病程，即使引起肺炎，也绝大多数是轻症，只有极少数会发展为重症。经过规范治疗，轻症和重症的预后较好，一般不会给肺造成严重的后遗症或不可逆的损伤。支原体感染病程相对比较长，一般是2~4周。目前也有一些小孩出现了流感、支原体、腺病毒、呼吸道合胞病毒等接连感染或叠加感染，也是造成呼吸道感染病程延长的原因。本文转自健康中国，本文来源于国家卫生健康委新闻发布会，由元素商城整理编辑转发，如有侵权，请告知删除。转载请注明出处。

健康报健康中国2023-12-2212:54发表于北京1963年，我国向阿尔及利亚派出第一支援外医疗队。60年来，我国累计向全球76个国家和地区派遣援外医疗队队员3万余人次，诊治患者近3亿人次。一代代中国援外医疗队队员与受援国人民同心同德、守望相助，让中国援外医疗的“金字招牌”熠熠生辉。 逆行出征驰援一线    几内亚是位于非洲西部的发展中国家。2014年年初，埃博拉病毒肆虐非洲，感染人数激增，病死率超过60%。首都医科大学附属北京友谊医院临危受命，由副院长王振常率第24批援几内亚中国医疗队逆行出征，奔赴一线执行埃博拉疫情防控任务。  “在当地开展防疫工作面临很大挑战，一切都是未知数。”王振常坦言，“大家在心理上是有所畏惧的，很多队员出发前都写了遗书，但全队没有一人退缩。”由中国援助的中几友好医院位于几内亚首都科纳克里，是这支医疗队工作的主阵地。一次，一位患者因潜伏期未查出病毒，病逝后才被确诊为埃博拉病毒感染，这让参与诊治的医疗队员们毫无防备地成为了密切接触者。“生死考验给大家带来一种无声的恐惧，这是令所有人最煎熬的时刻。”尽管如此，王振常对密接人员及时进行隔离监测和风险研判，确认医务人员安全后便马不停蹄地投入一线工作。授人以鱼不如授人以渔。为协助当地应对埃博拉疫情，中国政府提出无偿帮助几内亚政府培训1000名公共卫生医师，以提升当地疫情防控能力。“没有投影幕布，我们就用床单代替。当地经常停电，我们就背着沉重的蓄电池前往……”自接到任务后，王振常带领队员冒着高暴露风险，克服设备缺乏、交通不便、语言不通等困难，多次深入疫区开展培训工作。    2个月内，医疗队累计培训、带教当地医务人员、社区工作者及政府行政人员1679人，超额完成了既定目标。其间，中国政府还先后派出5批防疫专家组与该医疗队协同作战，为当地防控埃博拉疫情、建立公共卫生体系打下坚实基础。    历时一年半，医疗队帮助几内亚渡过了难关，而这支医疗队也成为第一支得到几内亚总统颁发几内亚“共和国勋章”的医疗队。“我们培训的当地医生现在已经给其他非洲国家医生做培训了。”王振常说。2015年7月，为纪念在抗击埃博拉疫情中不幸逝世的医务人员，几内亚政府号召全国医务工作者为白衣英雄家属募捐，以此鼓舞全国人民共同战胜疫情的决心和勇气。得知消息后，中国医疗队和中几友好医院医务人员一起响应号召，积极参与捐款。“虽然当地人不知道队员的名字，但他们记得中国医生，一批批中国援外医疗队的故事已在几内亚代代传颂。”王振常说。据了解，此次埃博拉疫情期间，中国先后派遣临床及公共卫生专家1200余人次，收治患者800余名，开展公共卫生培训1.3万余人次。共克时艰守护光明圭亚那位于南美洲北部，由于靠近赤道，当地日照强烈、紫外线强，居民多发眼部疾病。2020年10月，第16批援圭亚那中国医疗队抵达圭亚那首都乔治敦市，开始执行援外医疗任务。医疗队被分派到乔治敦医院和林登医院，两所医院都是圭亚那的公立医院，需要承接各地转院的危重疑难病例，手术量大、急诊手术多。面对医疗条件落后、医务人员稀缺等困难，中国医疗队队员直面多重压力和挑战。“新冠疫情正在全球流行，在公共卫生危机面前，中国医疗队的援助是对大国担当的全面检验。”该医疗队队员、苏州市立医院眼科副主任医师鲁曦婷如是评价这次援助。由援圭亚那中国医疗队在乔治敦医院成立的眼科中心，主要开展白内障手术治疗。“迫于疫情影响，每位白内障患者需要经历漫长的等待，一年多是常有的事。”鲁曦婷说，尽管面临诸多困难，中国医生仍尽可能地为双眼均为低视力的特殊患者适当优先安排手术。哈利真是一位独眼的独居老人，年轻时因外伤导致单眼失明。随着年龄渐长，他另一只眼的视力严重下降，生活难以自理。“独眼的白内障手术风险还是比较大的。”医疗队抵达后，鲁曦婷实施的白内障手术让老人重获清晰视界。一次，该医疗队队长、苏州市立医院肝胆外科主任医师乔志明收到了当地一位伤者的求救。该伤者在车间加工金属工件时，被砂轮刨出的金属铁屑击伤了眼睛，疼痛剧烈。由于新冠疫情原因，这名伤者迟迟未到医院接受治疗。在乔志明帮助下，该伤者来到乔治敦医院诊治。鲁曦婷在伤者的角膜下方发现了一个直径约1毫米的环形铁屑。“他的右眼充血很厉害，角膜也开始有感染的迹象，如不及时手术，角膜穿孔的后果将不堪设想。”然而，摆在鲁曦婷面前更大的难题是缺少眼科手术专业器械。凭借该院仅有的一台老旧裂隙灯，鲁曦婷就地取材找来一支一次性针筒，尝试借用针头来探取眼内异物。鲁曦婷一边安抚伤者情绪，一边打开裂隙灯，轻轻地翻开并固定伤者的眼睑，小心翼翼地将针头伸向角膜……凭借高超的医技，鲁曦婷仅用5分钟就将铁屑成功取出。“我原以为我要瞎了，是中国医生保住了我的眼睛！”这名伤者感慨地说。“医疗队每天都能收到不少求助短信和电话，乔志明队长会根据患者病情的轻重缓急进行分类，然后与医疗队相关专业的医生协调沟通落实诊疗。”鲁曦婷说。自2009年乔治敦医院“中国医疗队眼科中心”成立以来，医疗队累计开展眼科手术1.4万例，手术脱盲率达90%；中国医生被誉为“光明使者”，眼科也成为了当地的金牌科室。中西结合减轻病痛    在非洲中西侧几内亚湾东南部，有一座美丽的岛国——圣多美和普林西比。2023年3月，第18批援圣多美和普林西比中国医疗队抵达当地，在艾瑞斯·德·梅内塞斯医院和大水区中心门诊开展为期18个月的援外医疗任务。几周前，当地一位38岁的女性患者慕名找到该医疗队队员、四川大学华西口腔医院口腔颌面外科副主任医师杨波寻求帮助。经检查，该患者患有慢性牙髓炎，需进行拔牙治疗。杨波随即为患者注射了标准用量的麻醉药，患者却表示疼痛仍十分剧烈。由于患者有癫痫病史，杨波认为，如果此时强行拔牙可能会诱发癫痫，但在麻醉药物不足的情况下，若为该患者追加麻醉剂量，又将影响其他患者的治疗。进退两难之际，医疗队队员、通用技术环球医疗攀钢总医院中医康复科主治中医师卢忆给杨波带来了新的思路：“针灸治疗具有一定镇痛作用，可尝试针灸辅助镇痛，还可以起到改善焦虑情绪的作用。”在征得患者同意后，卢忆选择合谷、下关、颊车等穴位施针。“患者痛苦的表情一点一点放松下来了，疼痛有了明显减轻。”杨波随即使用拔牙器械用时仅1分钟便顺利将患者的病灶牙拔出。“我几乎没有感受到疼痛，这太神奇了！”术后，该患者不停赞叹手术的高效和舒适。“从事牙科助理10多年，第一次看到用针灸辅助拔牙，而且没想到效果如此之好！”在一旁观摩学习的当地牙科助理埃费林十分惊讶地说。卢忆所在的大水区中心门诊条件十分有限，但这也让他看到了中医施展身手的空间。“不错的疗效让当地居民对针灸十分认可。”卢忆说，常有许多当地患者慕名前来，看到他们对中医及中国医生信任的眼神，是一件让人感到最骄傲的事。据悉，截至2023年12月15日，该医疗队累计诊治门（急）诊患者2000余人次、住院患者500余人次，完成各类手术400余台次，开展中医针灸治疗1200余人次；巡回医疗诊治患者3100余人次，行程超过1500公里，覆盖圣多美和普林西比全国6个大区和最远的普林西比岛与罗拉斯岛。“针灸作为中医疗法的代表之一，在缓解疼痛方面已有几百年历史，而且所需材料简易，能在医疗物资匮乏的受援国充分发挥疗效与经济性的双重优势。”卢忆表示，这是医疗队首次运用中西医结合拔牙技术进行治疗，医疗队将继续推广该技术，以帮助更多当地需要局部麻醉及拔牙治疗的患者减轻病痛。本文转自健康报，由元素商城整理编辑转发，如有侵权，请告知删除。转载请注明出处。