元素百科资讯频道  本文主要讲的是采用硫酸二乙酯诱变乳酸菌选育技术的方法介绍，乳酸菌是生产酸奶的主要发酵剂，具有改善胃肠道功能、抗肿瘤提高免疫能力、改善机体营养状况减低胆固醇等特殊的生理功能，是决定酸奶发酵风味品质的关键因素。 本试验以新疆牧民自制酸奶疙瘩中筛选出的乳酸菌为出发菌株，选用DES对菌株进行诱变，选育在高温条件下产酸较强、在低温条件下产酸甚微的菌株；硫酸二乙酯单独用于乳酸菌诱变的报道并不多见，试验所获得的技术和工艺参数为乳酸菌选育技术的应用提供了理论和实际依据，具有很好地实际应用价值。 1材料与方法 1.1材料与仪器设备 乳杆菌(Lactobacillus)LN1#。 培养基与溶液：脱脂乳培养基；MRS培养基；pH值为7.0的磷酸缓冲液；生理盐水；DES溶液（1mLDES溶解于10mL无水乙醇中）。 仪器设备：UV-2102PC型紫外可见分光光度计；Delta320pH计；5804R离心机；LFRA质构仪；垂直净化工作台；HPS-160生化培养箱；DHP-9002恒温培养箱。 1.2方法 1.2.1菌种活化及生长曲线的测定 取菌种LN1#按3%接种于脱脂乳培养基中，42℃恒温培养12h。然后反复传代直至达到要求的活力；对菌种进行单因素实验，分别测定其最适生长温度、最适接种量、最适初始pH值。于最佳条件下测定菌株的生长曲线。 pH值采用pH211型酸度计测定；酸奶酸度酸度采用吉尔涅尔度表示；乳酸菌活菌数采用高层琼脂法测定；OD值的测量采用紫外可见分光光度计测定，波长为600nm。 1.2.2DES诱变条件的确定 取对数生长期菌液5mL，离心并以PBS（pH值为7.0的磷酸缓冲液）洗涤2次，用磷酸缓冲液稀释到一定浓度，转入10mL离心管中。在36～41℃条件下，加入质量分数为0.5%～1.0%的DES溶液，处理20～30min，按照2.5倍DES溶液体积加入质量分数为25%硫代硫酸钠溶液终止反应。通过改变菌液浓度、DES溶液的体积分数、诱变时间、诱变温度控制致死率。 1.2.3诱变效应的测定 采用对照菌株6032、初始菌株LN1#、突变菌株N01#制作酸奶，于10℃储藏，隔天测定其酸度；酸奶物性指标影响程度分析方法采用以下模式：循环次数为2；测量力为20g；测量速度为9mm/s；测量的深度为9mm；探头型号为TA-4。 2结果 对LN1#进行DES诱变，得到最佳参数：DES质量分数为0.7%，诱变时间为30min，诱变温度为37℃；得到一突变菌株N01#，其37℃贮藏时产乳酸量与出发菌株一样，而在10℃贮藏时，产乳酸量明显减少，突变菌株N01#的遗传稳定性较好,不易回复突变；用N01#发酵酸奶，测定酸奶的物性指标，其结果显示，N01#与LN1#无明显差别；与对照组相比较，N01#发酵的酸奶其后酸化时间延长了3天。 以上就是关于本次试验中乳酸菌选育技术方法的具体介绍，希望能够对大家提供参考依据。   你可能感兴趣的栏目：化学试剂网 ，化学元素表，化学元素周期表口决，化学元素周期表读音，化学元素周期律，化工词典

元素百科资讯频道  本文主要讲的是关于硫酸二乙酯在诱变处理果胶酶中作用的内容，果胶酶是能分解果胶质的一类含多种酶的复合酶，普遍存在于植物果实和微生物中。在自然界中，果胶质广泛存在于高等植物中，是植物体中一类复杂的胶体性糖类，它是由D半乳糖醛酸以α-1，4糖苷键形成的直链状聚合物，是植物细胞间的胞间层和初生壁的重要组分，在麻纤维中含量较高。 由于果胶质在植物的细胞组织中起着“粘和”作用，一旦植物组织中的果胶质分解便引起细胞的离散。通过果胶酶的作用，可将果胶质降解为小分子物质，从纤维中游离出来，可使与其粘合在一起的其他杂质(如蜡质、蛋白质、灰份等)与纤维素彻底分开，达到麻脱胶的目的。 果胶酶产生菌在沤麻过程中的应用可使沤麻周期缩短，提高亚麻纤维的质量及出麻率。诱变育种方法虽然是不定向变异，但诱变结果相对于单纯的培养基选育均有较大的突变率。菌种通过合适的诱变，能更好地选育出产酶量更高、酶学性质更稳定、针对性更强的新菌株。目前以辐照诱变和化学诱变较为多见，且效果较好。李延生等使用微波诱变表明，诱变的突变率较大，且最高正突变发生的酶活力都要高出数十个百分点。Hadj-TaiebNoomen采用亚硝酸对青霉菌(Penicilliumoccitanis)进行诱变，得到1株突变型菌株CT1，该菌株产酶活力远远高于原始菌株，并且不需果胶或其他类似物的诱导，降低了生产成本。 硫酸二乙酯诱变育种的方法 一、硫酸二乙酯诱变处理 a.菌悬液的制备:将HDYM-02接2环菌至30mL种子发酵液中，37℃、120r/min摇床培养18h，3000r/min离心20min，弃上清，用0．1mol/LpH7．0磷酸缓冲液30mL离心洗涤2次，将沉淀下来的菌体用磷酸缓冲液悬浮稀释，并将菌悬液调至浓度为107～108cfu/mL； b.硫酸二乙酯处理过程:取菌悬液4mL加入装有16mL的磷酸缓冲液中，再加入硫酸二乙酯0．2mL，按规定时间(30、60min)处理，用0．5mL25%(质量与体积比)的硫代硫酸钠溶液中止反应； c.诱变后的处理:中止反应后的菌液用生理盐水离心洗涤3次，梯度稀释至10－4、10－5、10－6，涂布分离培养基平板后培养，每只平板加稀释液0．2mL，每个稀释度涂平板3只，以同样操作取未经紫外照射的平板作对照，用黑布包好，置37℃培养48h，记录菌落数并计算致死率。挑取致死率在70～80%的单菌落，中间培养后进行初筛。 二、突变株的筛选 a.刚果红染色法初筛:将出发菌株及诱变后的菌株，在牛肉膏蛋白胨培养基上于37℃培养12h，待菌落长出后，于其上铺上层初筛培养基，继续培养6h，然后用0．1%的刚果红染色剂染色15min，倾去染色剂，用1mol/LNaCl溶液荡洗平板15min，静置待透明圈显现后，用游标卡尺测量透明圈直径(H)及菌落直径(C)，计算H/C值，挑选H/C值大于出发菌株的突变菌株进行复筛(测定酶活)； b.酶活力测定方法:接2环进行复筛的菌株于种子发酵液培养18h，按3%的接种量接入扩大培养液，分别在培养6、12、24、48、72h时取出菌液，测定其OD590nm，离心弃沉淀，上清液即为粗酶液。取0．25%(质量与体积比)的果胶溶液(用pH6．8的磷酸缓冲液配制)1mL于试管中，加磷酸缓冲液2mL50℃水浴中平衡后，加入适当稀释的酶液1mL保温30min，用DNS法测定水解产生的还原糖。在上述条件下，每分钟由底物产生1μmol还原糖(以半乳糖醛酸计)所需的酶量定义为1个酶活单位。 三、结果 经硫酸二乙酯多次诱变，通过初筛挑选出3株突变株，其中1株突变株在12h时的酶活力为39U达到产酶高峰，而此时出发菌株的酶活力为27U，说明此株突变株的产酶期提前，且12h的酶活力是出发菌株的1．44倍。如果将此株突变株投入生产其产酶高峰早可以使沤麻期缩短。 以上就是关于硫酸二乙酯在诱变处理果胶酶中作用的全部内容。   你可能感兴趣的栏目：化学试剂网 ，化学元素表，化学元素周期表口决，化学元素周期表读音，化学元素周期律，化工词典

元素百科资讯频道  本文主要讲的是关于铁氰化钾的合成与应用的文章，铁氰化钾，别名六氰合铁(III)酸钾，是一种无机化合物，化学式为K3[Fe(CN)6]，俗称赤血盐、赤血盐钾、六氰合铁酸钾。该物质的摩尔质量329.24 g·mol-1，固体密度为1.89 g/cm3，IUPAC名为potassium hexacyanoferrate(III)。该亮红色固体盐可溶于水，水溶液带有黄绿色荧光，含有[Fe(CN)6]3−配离子，其他阴离子为亚铁氰化钾。主要应用于照相纸、颜料、制革、印刷、制药、肥料、媒染剂、电镀、造纸、钢铁等工业。 铁氰化钾的合成 方法一（氯气氧化法）                       分子结构 由黄血盐钾作原料，采用氯气氧化法制得，或用电解法使黄血盐钾发生氧化还原反应制得。氯气氧化法黄血盐钾热溶液在氯气作用下，于60～65 ℃左右进行氧化生成赤血盐钾。控制反应料液pH值为6～7时，停止通入氯气，再加入高锰酸钾饱和溶液，并以硫酸高铁铵检验为棕红色为止。用盐酸调节物料的酸碱度，使pH值为7～8，反应后物料经沉降、过滤、真空蒸发至溶液相对密度12时，再经冷却结晶、离心分离、干燥，得赤血盐钾成品。 方法二 将工业铁氰化钾溶于水中。过滤，冷却，吸滤所析出的结晶，洗涤。在室温下干燥，得纯品铁氰化钾。 方法三 将工业品六氰合铁（Ⅲ）酸钾加到水中（350 mL水中加130～135 g），搅拌，加热（ 不超过70 ℃），待全部溶解后，过滤，冷却结晶，离心甩干，用少量水洗涤，在室温下干燥，即得分析纯成品。 方法四（电解法） 将黄血盐钾的饱和溶液在60 ℃以下进行电解，使黄血盐钾发生自偶氧化还原反应生成赤血盐钾及副产品氢氧化钾。待电解液中铁氰化钾含量达320 g/L时开始冷却结晶，浓度降至280 g/L后进行分离、干燥，制得赤血盐钾成品。 铁氰化钾的应用 1、漂白剂 卤化银彩色感光材料冲洗的漂白剂，黑白感光材料的减薄剂，黑白照片调棕色的漂白剂。广泛采用的高温快速彩色冲洗工艺已不使用。但彩色电影胶片的冲洗仍大量使用。 2、腐蚀剂 用于制造油漆、油墨、色素、制药、金属热处理、食盐防结块剂，食品添加剂以及钢铁工业 和揉革等等。腐蚀剂，铁氰化钾与氢氧化钠、水混合可以作为合金腐蚀剂。 3、色谱分析用试剂 点滴分析测定高铁、铯、镓、汞、锌和二氧化铀等。有机合成的缓和氧化剂。氮肥生产中甲醇的含硫量分析。农药除草醚生产中废水分析。 4、温和氧化剂 铁氰化钾用于蓝图印刷术及摄影的卡罗法中，也可在有机合成中作温和氧化剂。 5、还原剂 生理学实验中用铁氰化钾来提高溶液的氧化还原电势（E ~ 436 mV, pH 7），常以连二亚硫酸钠作还原剂（E ~ 420 mV, pH 7）。 实验室中通常用铁氰化钾作为铁的来源，使鲁米诺发光。 6、滕氏蓝 滕氏蓝是蓝图印刷中使用的颜料，由K3[Fe(CN)6]与二价铁反应制得。  组织学上用K3[Fe(CN)6]来检测生物组织中的二价铁离子，在酸性溶液中与二价铁离子反应生成不溶的蓝色颜料，被称为滕氏蓝。检测三价铁离子时使用的则是亚铁氰化钾，也生成不溶的蓝色颜料，称为普鲁士蓝。研究表明滕氏蓝与普鲁士蓝是同一物质，颜色略有不同是因为制备方法等的不同而导致的。 7、铁氰化钾固体 铁氰化钾与酚酞混合得到铁锈指示剂，遇到亚铁离子会变蓝（滕氏蓝），可用于检测金属的氧化程度。用色度计分析深蓝色的Fe4[Fe(CN)6]3，可以算出起始的Fe离子摩尔数。 8、溶液分析 分析测定高铁、铯、镓、汞、锌、二氧化铀等。用于溶液分析，如钝化液的含铬量的分析。 以上就是关于铁氰化钾的合成与应用的全部内容的介绍了。   你可能感兴趣的栏目：化学试剂网 ，化学元素表，化学元素周期表口决，化学元素周期表读音，化学元素周期律，化工词典