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辣根过氧化物酶(HRP)的来源、性状、用途及生化机理
辣根过氧化物酶(HRP)的来源、性状、用途及生化机理
2014-11-28 10:15:19
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元素百科资讯频道:本文主要介绍辣根过氧化物酶(HRP)的来源、性状、用途及生化机理。辣根过氧化物酶(简称HRP,EC.1.11.1.7)是植物中的一种过氧化物酶,早在20世纪30年代就有人着手从辣根中分离此酶,以后又制备出结晶。通常试验中以辣根为原料,经过水的抽提,硫酸铵和丙酮分级分离,再经锌离子纯化,透析除盐,冰冻干燥,便可得到高纯度的辣根过氧化物酶。
辣根过氧化物酶的性状
辣根过氧化物酶是一种单链多肽,含有4个二硫桥。它是一种分子量达44 000的糖蛋白,由无色的酶蛋白和深棕色的铁卟啉结合而成,中性糖和氨基糖约占18%,主要有甘露糖、木糖、阿拉伯糖和己糖胺等。溶于水,溶解度为5%(W/V),溶液呈棕红色,透明。
辣根过氧化物酶的用途
辣根过氧化物酶是目前使用最广泛的一种标记酶,用来标记抗体或其它蛋白质,既能用于定位检测,也能用于定量测定。它是用于生物化学中的应用,如血糖试纸、尿液分析试纸、临床化学和免疫学等。
辣根过氧化物酶的生化机理
辣根过氧化物酶与底物孵育时,产生一种着色、荧光或发光标记的分子的衍生物,以便可以定量。辣根过氧化物酶已被证明抑制cydAB突变,使其突变水平稍微降低。已知其抑制剂是叠氮化钠,L-胱氨酸,重铬酸盐,亚乙基硫脲,羟基胺,硫化物,钒酸,对氨基苯甲酸,和Cd2+, Co2+, Cu2+, Fe3+, Mn2+, Ni2+, 和 Pb2+离子。
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