元素百科资讯频道   本文主要讲的是关于硫酸二乙酯在诱变处理果胶酶中作用的内容，果胶酶是能分解果胶质的一类含多种酶的复合酶，普遍存在于植物果实和微生物中。在自然界中，果胶质广泛存在于高等植物中，是植物体中一类复杂的胶体性糖类，它是由D半乳糖醛酸以α-1，4糖苷键形成的直链状聚合物，是植物细胞间的胞间层和初生壁的重要组分，在麻纤维中含量较高。

由于果胶质在植物的细胞组织中起着“粘和”作用，一旦植物组织中的果胶质分解便引起细胞的离散。通过果胶酶的作用，可将果胶质降解为小分子物质，从纤维中游离出来，可使与其粘合在一起的其他杂质(如蜡质、蛋白质、灰份等)与纤维素彻底分开，达到麻脱胶的目的。

果胶酶产生菌在沤麻过程中的应用可使沤麻周期缩短，提高亚麻纤维的质量及出麻率。诱变育种方法虽然是不定向变异，但诱变结果相对于单纯的培养基选育均有较大的突变率。菌种通过合适的诱变，能更好地选育出产酶量更高、酶学性质更稳定、针对性更强的新菌株。目前以辐照诱变和化学诱变较为多见，且效果较好。李延生等使用微波诱变表明，诱变的突变率较大，且最高正突变发生的酶活力都要高出数十个百分点。Hadj-TaiebNoomen采用亚硝酸对青霉菌(Penicilliumoccitanis)进行诱变，得到1株突变型菌株CT1，该菌株产酶活力远远高于原始菌株，并且不需果胶或其他类似物的诱导，降低了生产成本。

硫酸二乙酯诱变育种的方法

一、硫酸二乙酯诱变处理

a.菌悬液的制备:将HDYM-02接2环菌至30mL种子发酵液中，37℃、120r/min摇床培养18h，3000r/min离心20min，弃上清，用0．1mol/LpH7．0磷酸缓冲液30mL离心洗涤2次，将沉淀下来的菌体用磷酸缓冲液悬浮稀释，并将菌悬液调至浓度为107～108cfu/mL；

b.硫酸二乙酯处理过程:取菌悬液4mL加入装有16mL的磷酸缓冲液中，再加入硫酸二乙酯0．2mL，按规定时间(30、60min)处理，用0．5mL25%(质量与体积比)的硫代硫酸钠溶液中止反应；

c.诱变后的处理:中止反应后的菌液用生理盐水离心洗涤3次，梯度稀释至10－4、10－5、10－6，涂布分离培养基平板后培养，每只平板加稀释液0．2mL，每个稀释度涂平板3只，以同样操作取未经紫外照射的平板作对照，用黑布包好，置37℃培养48h，记录菌落数并计算致死率。挑取致死率在70～80%的单菌落，中间培养后进行初筛。

二、突变株的筛选

a.刚果红染色法初筛:将出发菌株及诱变后的菌株，在牛肉膏蛋白胨培养基上于37℃培养12h，待菌落长出后，于其上铺上层初筛培养基，继续培养6h，然后用0．1%的刚果红染色剂染色15min，倾去染色剂，用1mol/LNaCl溶液荡洗平板15min，静置待透明圈显现后，用游标卡尺测量透明圈直径(H)及菌落直径(C)，计算H/C值，挑选H/C值大于出发菌株的突变菌株进行复筛(测定酶活)；

b.酶活力测定方法:接2环进行复筛的菌株于种子发酵液培养18h，按3%的接种量接入扩大培养液，分别在培养6、12、24、48、72h时取出菌液，测定其OD590nm，离心弃沉淀，上清液即为粗酶液。取0．25%(质量与体积比)的果胶溶液(用pH6．8的磷酸缓冲液配制)1mL于试管中，加磷酸缓冲液2mL50℃水浴中平衡后，加入适当稀释的酶液1mL保温30min，用DNS法测定水解产生的还原糖。在上述条件下，每分钟由底物产生1μmol还原糖(以半乳糖醛酸计)所需的酶量定义为1个酶活单位。

三、结果

经硫酸二乙酯多次诱变，通过初筛挑选出3株突变株，其中1株突变株在12h时的酶活力为39U达到产酶高峰，而此时出发菌株的酶活力为27U，说明此株突变株的产酶期提前，且12h的酶活力是出发菌株的1．44倍。如果将此株突变株投入生产其产酶高峰早可以使沤麻期缩短。

以上就是关于硫酸二乙酯在诱变处理果胶酶中作用的全部内容。