元素百科为您介绍细胞冻存的原理以及操作步骤。细胞冻存是细胞保存的主要方法之一。利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存，可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来，这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。 细胞冻存的原理细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融，实验证明这样可以最大限度的保存细胞活力。目前细胞冻存多采用甘油或二甲基亚砜作保护剂，这两种物质能提高细胞膜对水的通透性，加上缓慢冷冻可使细胞内的水分渗出细胞外，减少细胞内冰晶的形成，从而减少由于冰晶形成造成的细胞损伤。复苏细胞应采用快速融化的方法，这样可以保证细胞外结晶在很短的时间内即融化，避免由于缓慢融化使水分渗入细胞内形成胞内再结晶对细胞造成损伤。 细胞冻存的操作步骤1.配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的冻存培养液；2.取对数生长期的细胞，去除旧培养液，用PBS清洗。3.去除PBS，加入适量胰蛋白酶（覆盖培养皿表面）把单层生长的细胞消化下来；4.离心1000rpm，5min；5.去除胰蛋白酶，加入适量配制好的冻存培养液，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，计数，调节冻存液中细胞的最终密度为5×106/ml～1×107/ml；6.将细胞分装入冻存管中，每管1～1.5ml；7.在冻存管上标明细胞的名称，冻存时间及操作者；8.冻存：标准的冻存程序为降温速率-1～-2℃/min；当温度达-25℃以下时，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃时，则可迅速浸入液氮中。也可将装有细胞的冻存管放入-20℃冰箱2h，然后放入-70℃冰箱中过夜，取出冻存管，移入液氮容器内。

元素百科为您介绍细胞复苏的步骤以及注意事项。细胞复苏，生物学的一种术语，是指将冻存在液氮或者-70℃冰箱中的细胞解冻之后重新培养，细胞恢复生长的过程。 细胞复苏的步骤①将冷冻管从液氮中取出，迅速投入37℃水浴融化，细胞融化后要尽快(约1min)移出37℃水浴。37℃水浴时间延长会提高细胞死亡率，复苏过程中一般细胞死亡率在20%～25%之间。②迅速用酒精棉球擦拭冷冻管外部杀菌消毒，然后放置在冰浴上。③小心开启瓶盖，把细胞转入含有4mL培养基的培养瓶中，然后把培养瓶移至培养箱，26℃～28℃培养1h，让细胞贴壁。④细胞贴壁后，小心移弃培养基，主要是去掉DMSO(悬浮生长细胞要通过离心沉淀除去DMSO)、死细胞及其碎片，加5mL新鲜培养基，26℃～28℃培养。⑤细胞培养24h后，更换新鲜培养基，继续培养直到形成单层，便可以传代。⑥详细记录复苏细胞的名称、数量、复苏时间、存放部位等。 细胞复苏的注意事项1、注意无菌操作。2、应在1-2min内使冻存液完全融化。如果复温速度太慢，则会造成细胞损伤。另外，细胞复苏后的操作最好在4℃冰浴中进行，以减少冷冻保护剂对细胞的毒性。3、细胞复苏过程中，升温的速率要大，把从液氮或-70℃冰箱中取出的细胞在最短的时间内放入水浴锅。4、细胞放入水浴中注意用镊子夹住细胞冻存管并在水浴中不时晃动，使其受热均匀，并防止水浴时水进入细胞冻存管污染细胞。打开细胞冻存管之前要用酒精棉球将冻存管消毒并晾干。5、液氮操作有一定的危险性，打开液氮罐取出细胞时，戴上防护眼镜。6、如果冻存管密封不严，液氮可被吸入。由于解冻时冻存管中的气温急剧上升，将可能发生爆炸。复苏过程中应盖上恒温水浴锅的盖。

元素百科为您介绍深孔板的种类以及使用范围。什么是深孔板？深孔板在普通微孔板（主要是96、384孔板）的外观尺寸基础上，保持长、宽符合SBS国际规范的同时，增加孔的深度，以此达到增加每个孔的容积的目的。 深孔板的种类1、按孔数分类，较常见的可分为96孔板、384孔板。2、按孔型分类，96孔板主要可分为圆孔型和方孔型。其中384孔板全部为方孔型。3、按孔底形状分类，常见主要有U型和V型两种。 深孔板的使用范围①储存样品：可以替代常规的1.5ml离心管储存样品，并且储存时摆放整洁，节省空间，储存量大，可耐受-80℃冰箱。故又被叫做储存块。②处理样品：可以结合排枪、高通量自动液体操作仪器和软件，实现对生物样品的高通量操作，比如沉淀蛋白，液液萃取。大大提高样品处理的效率。PP材质更可以耐受121℃高温高压灭菌处理。③进样操作：通用于各种自动进样器，可直接放在自动进样器的样品仓中进样，相比传统的进样小瓶，不但可以成倍样品仓的样品摆放数量，另外还实现了样品在96孔板上处理后直接进样，省去了来回吸取样品，摆放样品，盖盖子，插内插管，洗瓶子等繁琐的工作。